Coronavirus (SARS-CE-1) Ntau lub sijhawm PCR
Qhov kev nkag siab heev, npaj-rau-siv PCR Cov Khoom Siv PCr yog muaj nyob hauv Lyophilized hom (khov-qhuav txheej txheem) rau lub sijhawm ntev cia. Cov khoom siv tuaj yeem thauj thiab khaws cia ntawm chav tsev kub thiab yog qhov ruaj khov rau ib xyoos. Txhua lub raj ntawm qhov premix muaj tag nrho cov reagents xav tau rau permix xav tau rau permix xav tau rau cov kev ua kom rov qab-transcriptase, primers, thiab dntps substrates. Nws tsuas yog xav tau ntxiv 13ul distilled dej thiab 5ul extracted RNA qauv, tom qab ntawd nws tuaj yeem khiav thiab nthuav dav ntawm PCR cov cuab yeej.
Lub QPCR yuav tsum ua kom tau raws li cov cai hauv qab no:
1. Haum 8 Sawb Prire raj ntim 0.2 ml
2. Muaj ntau tshaj plaub qhov kev pom tau raws:
Tshooj | Excitation (NM) | Emission (NM) | Pre-calibrated dyes |
1. | 470 | 525 | Ntxiag, cov sbr ntsuab i |
2 | 523 | 564 | Vic, Hex, Tet, Joe |
3. | 571 | 621 | Rox, Texas-Liab |
4 | 630 | 670 | Cy5 |
PCR-Platforms:
7500real-sij hawm PRR system, Biorad CF96, Iycycler IQ ™ Riod Kev Khwv Qhov Txheej Txheem, Stratagene MX3000P, MX3005P
Qhov nyuaj ntawm cov kab mob txias ntawm cov coronavirus nucleic acid kuaj tau reagent
Thaum cov pa roj acid nucle acid tau thauj mus los hauv ntev ntev, cov (-20 ± xwb thiab tsheb thauj mus los yog kom ntseeg tau tias cov enzyme hauv cov reagents nyob active. Txhawm rau kom paub tseeb tias qhov ntsuas kub nce mus txog tus qauv, ntau ob peb kilograms uas xav tau rau txhua lub thawv ntawm nucleic acid kuaj reasent txawm tsawg dua 50g, tab sis nws tsuas yog nyob ntev li ob lossis peb hnub. Ntawm qhov kev pom ntawm kev lag luam xyaum, qhov hnyav tiag tiag ntawm cov neeg reagents muab los ntawm cov tuam ntxhab yog tsawg dua 10% (lossis deb dua cov nqi no) ntawm lub thawv. Feem ntau ntawm qhov hnyav los ntawm cov dej khov qhuav, cov thawv dej khov thiab ua npuas dej, yog li tus nqi thauj mus los yog qhov siab heev.
Nyob rau hauv lub Peb Hlis 2020, Covid-19 pib tawg tawm hauv qhov loj txawv txawv teb chaws, thiab qhov kev thov rau cov ntaub sab nrauv tshiab ua kom tau txais cov tshuaj reagatically. Txawm hais tias tus nqi tsim nyog ntawm kev xa tawm cov reagents hauv saw txias, cov tuam ntxhab feem ntau tseem tuaj yeem txais nws vim muaj ntau ntau cov txiaj ntsig.
Txawm li cas los xij, nrog kev txhim kho ntawm National Adpic cov khoom lag luam rau anti-pandemic cov khoom lag luam dhau ntawm cov neeg caij tsheb thauj mus los ntawm cov teeb meem khoom thauj mus los, uas tau tshwm sim hauv cov khoom muaj teeb meem los ntawm kev thauj mus los. Kev thauj mus los ncua sijhawm (caij tsheb mus los ntawm ib nrab ntawm ib hlis ib zaug yog ntau heev) ua rau cov khoom lag luam nquag thaum cov khoom lag luam ncav cuag tus neeg siv khoom. Qhov no muaj teeb meem feem ntau nucleic acid reagents lag luam.
Lyophilized thev naus laus zis rau PC reagent pab cov kev thauj mus los ntawm cov kab mob tshiab coronhavirus nucleic acid kuaj tau reagent thoob ntiaj teb
Cov lus qhia ntawm Lyophilized Psebents tuaj yeem thauj thiab khaws cia ntawm chav tsev tsheb thauj mus los, tab sis kuj tseem yuav muaj teeb meem los txo cov txheej txheem kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los ntawm kev thauj mus los. Yog li ntawd, Lyophilizing lub reagent yog txoj hauv kev zoo tshaj los daws cov teeb meem ntawm kev xa tawm kev thauj mus los.
Lyophilization cuam tshuam ib qho kev daws teeb meem rau hauv lub xeev ruaj khov, thiab tom qab ntawd sublimate thiab cais dej vapor raws li lub tshuab nqus dej. Lub solute qhuav tseem nyob hauv cov thawv nrog cov qub muaj pes tsawg leeg thiab kev ua si. Piv nrog cov kua roj uas muaj kuab, tag nrho cov kev sib xyaw ua ke Lyophilized cov khoom siv acid tuaj yeem ua los ntawm kev txwv Bio muaj cov yam ntxwv hauv qab no:
Tsis tshua muaj zog cua muaj zog:Nws tuaj yeem nrog kev kho mob thaum 56 ℃ rau 60 hnub, thiab kev ua haujlwm morphology thiab kev ua haujlwm ntawm reagent nyob tsis hloov.
Qhov kub thiab txias thiab kev thauj mus los:Tsis tas yuav muaj cov saw txias, tsis tas yuav khaws cia ntawm qhov kub tsawg ua ntej kev tso tseg, tso tso tawm qhov chaw txias txias.
Npaj-siv-siv:Lyophilizing ntawm tag nrho cov khoom siv, tsis xav tau kev teeb tsa kev teeb tsa, zam qhov poob ntawm cov khoom siv nrog cov viscs loj xws li enzyme.
Ntau lub hom phiaj hauv ib lub raj:Cov lus pom tau hais npog npog cov khoom tshiab Coronavirus Orf1ab gene kom tsis txhob muaj cov kab mob genye. Txhawm rau kom txo tseeb tsis zoo, tib neeg rnesase P noob siv los ua kev tswj hwm sab hauv, yog li kom tau raws li kev kho mob xav tau kev tswj xyuas kom zoo.